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陽離子脂質體的制備用薄膜水化-超聲法制備脂質體。按處方比例稱量脂材,溶于盛1 mL氯仿-甲醇( 1 ∶ 1 ,v/ v)的雞心瓶中,45℃水浴下旋轉蒸發除去有機溶劑,使脂材在瓶壁上形成一層均勻的膜,去掉水浴繼續抽真空1 ~2 h。取DFA儲備液( 100 ug · mL)水化脂膜,渦旋振蕩制成脂質體。將脂質體放入水浴中超聲5 min,過0.22 um水膜制備粒徑均一的脂質體。分別制備由F-PEC-DSPE修飾的葉酸受體靶向脂質體(DPPC/DC-cholF-PEG-DSPE,10 ∶ 10∶0.75,摩爾比)和PEC-DSPE修飾的非靶向脂質體(DPPC/DC-chol/PEG-DSPE,10 :10:0.75 ,摩爾比)。
脂質體粒徑及電位測定：將制備的脂質體混懸液稀釋至適當倍數,用激光粒度分布儀測定脂質體的粒徑大小及分布和電位。
脂質體粒徑及電位測定：將制備的脂質體混懸液稀釋至適當倍數,用激光粒度分布儀測定脂質體的粒徑大小及分布和電位。
脂質體包封率的測定取包封DFA 的脂質體混懸液0.5 mL加人葡聚糖C-50 凝膠柱( 1cm x15cm)中,以 PBS洗脫未包封的DFA 并收集脂質體,以每份1.5 mL接取,記錄洗脫曲線，得到包封DFA的脂質體混懸液。取分離后的包封 DFA的脂質體混懸液0. 1 mL,加入10% Triton X-100溶液0.1mL破壞脂質體,以 PBS稀釋到適宜濃度,測定溶液的熒光強度。另取0.1 mL未經分離的脂質體混懸液,同樣加入10% Triton X-100溶液0. 1 mL破壞脂質體,用PBS稀釋到適宜濃度作為對照液測定熒光強度。經標準曲線換算成濃度后計算包封率。
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瑞禧簡介-DFA與脂質體的應用
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