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瑞禧水溶性CdTe量子點625QDs-MAb修飾2F11/ER抗體/蛋白單抗
水溶性量子點(QD)作為一種新型的生物熒光探針,在免疫生物學研究中有著廣闊的應用前景,今天瑞禧生物小編分析量子點熒光探針,一起看看吧:
取1 mmolL的水溶性CdTe熒光量子點100 pul,加0. 05 molL的硼酸鹽緩沖液400 pul,充分混合;配制1.3 mg/50 ul EDC偶聯劑,取10 ul偶聯劑加入上述體系中,活化 15 min;加入單克隆抗體 Pan CK20ug,混勻;室溫反應2 h后,4℃孵育過夜;次日將反應物12 000 r/ min條件下離心 20 min并去除沉淀物;取上清用透析袋透析(母液PBS緩沖液,pH7.4),4℃避光透析4 h,透析過程中每隔1 h換Ⅰ次PBS緩沖液;透析結束后,吸出透析袋內液體,置于另一清潔的eppendorf管中,4℃冰箱保存備用。
分析625QDs-MAb熒光探針直接免疫熒光檢測結果。無論在低倍鏡下還是在高倍鏡下(HepG2細胞的胞漿內呈現均勻分布的明亮的紅色熒光,胞漿和胞核界限分明,背景清晰,CK定位與免疫細胞化學染色結果一致;陰性對照未見明顯熒光。表明625QD:-MAb探針能特異性識別HepG2細胞內Pan CK蛋白;與 FITC標記相比,625QDs標記的圖像信號發光強度更高,更有特異性。
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