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GPI錨定蛋白（GPI-anchored protein, GPI-AP）是一類通過其羧基末端的糖基化磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidy-1-inositol ,GPI)結(jié)構(gòu)錨定于真核細(xì)胞膜表面的蛋白。

下面瑞禧生物小編和大家一起來(lái)了解一下 GPI錨定蛋白的細(xì)胞膜表面修飾的內(nèi)容。

隨著對(duì)GPI錨定蛋白研究的不斷深入，人們開始利用GPI/格傳統(tǒng)的跨膜型表面蛋白罐定于細(xì)胞表面以發(fā)揮其功能,逐步建立了GPI錨定蛋白轉(zhuǎn)移法細(xì)胞表面左程技木的。該技術(shù)主要包括以下幾個(gè)方面:①構(gòu)建感興趣蛋白與GPI信號(hào)肽的融合分子:②GPI錨定蛋白的表達(dá)和純化;③GPI錨定蛋白的轉(zhuǎn)移和細(xì)胞表面修飾。根據(jù)對(duì)蛋白質(zhì)側(cè)向活動(dòng)性的不同要求,人們所嵌合的GPE信號(hào)肽所附帶的氨基酸序列的長(zhǎng)度也不一致。

目前,人們所采用的AF、堅(jiān)LA.P(Placextal alkalire. pbosphataser ,胎盤堿性磷酸酶)等天然錨定蛋白質(zhì)的羧基端GF核信號(hào)肽,都有不同的長(zhǎng)度[g。嵌合性cDNA構(gòu)建到合適的真核表達(dá)載體后，轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞，如 CHO 細(xì)胞系等,可篩選到高表達(dá)的細(xì)胞株。有研究報(bào)道，如果載體中含有GS或DHFR基因,就可以用MSX或 MTX進(jìn)行加壓篩選,更容易獲得高表達(dá)的細(xì)胞株。有研究報(bào)道，用GS真核表達(dá)系統(tǒng),從10:細(xì)胞中,可得到 100ug 的GPI 錨定蛋白。