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瑞禧提供(Bodipy/CY系列菁染料)熒光染料原理及科研應用方法綜述
西安瑞禧生物科技有限公司目前在銷售的熒光染料主要有幾大類包括有:CY系列菁染料,Bodipy系列染料,香豆素及雙光子香豆素系列染料,近紅外區域IR系列,ICG系列染料,TO噻唑橙系列染料,PH敏感型熒光染料。
熒光染料:
熒光染料是指吸收某一波長的光波后能發射出另一波長大于吸收光的光波的物質。它們大多是含有苯環或雜環并帶有共軛雙鍵的化合物。熒光染料可以單獨使用,也可以組合成復合熒光染料
熒光產生原理:
熒光是一種光致發光現象。當紫外光,或某種光,照射到熒光物質上時,該物質就會吸收與其特征頻率相一致的能量,從基態躍遷到能量較高的激發態。
在不穩定的激發態下的分子會在短暫的時間內轉移弛豫到激發態的最低振動能級,平衡激發態上,再由該處回落到基態的較高振動能級上。在回落過程中以熒光的形式衰減能量,停止照射時熒光也隨即消失。
熒光染料可單獨使用,也可組合成復合熒光染料使用。其中復合熒光染料是利用熒光共振能量轉移技術合成的熒光染料,由距離非常近、能量可以在彼此間傳遞的一個供體及一個受體熒光物分子所組成。復合染料在受體分子的激發波長被激發,在供體分子的發射波長發射一個光子。熒
科研應用:
熒光染料,由于靈敏度高,操作方便,逐漸取代了放射性同位素作為檢測標記,其廣泛應用于熒光免疫,熒光探針,細胞染色等。包括特異性的DNA染色,用于染色體分析、細胞周期、細胞凋亡等相關研究。另有很多核酸染料在多色染色系統中是非常有用的復染劑,可作為背景對照,標記細胞核使細胞內結構的空間關系亦十分清晰。
1.免疫分析
熒光標記的單克隆抗體技術為流式細胞儀在研究細胞膜和細胞內各種功能性抗原、腫瘤基因蛋白等領域擴展了無限的應用空間。熒光探針可以通過蛋白質交聯劑共價結合在單克隆抗體上。免疫熒光標記最常用的染料有異硫氰酸熒光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)、藻紅蛋白(PE)以及AlexaFluor系列染料等。
2. 核酸檢測
核酸熒光染料對細胞核染色后定量測量細胞所發出的熒光強度,就可以確定細胞核中DNA、RNA的含量,并可以對細胞周期和細胞的增殖狀況進行分析。有多種熒光染料可以對細胞中的DNA或RNA染色,常用的DNA染料包括碘化丙啶(PI)、DAPI、Hoechst 33342等,RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
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